Javascript ti wa ni pipa ni bayi ninu ẹrọ aṣawakiri rẹ. Diẹ ninu awọn ẹya ara ẹrọ ti oju opo wẹẹbu yii kii yoo ṣiṣẹ nigbati a ba mu JavaScript kuro.
Forukọsilẹ pẹlu awọn alaye pato rẹ ati oogun kan pato ti o nifẹ si ati pe a yoo baamu alaye ti o pese pẹlu awọn nkan ninu ibi ipamọ data wa ti o gbooro ati firanṣẹ ẹda PDF kan si ọ lẹsẹkẹsẹ.
Àwọn granules Ban-Lan-Gen ń dín ìfàsẹ́yìn onígbà díẹ̀ tí dextran sodium sulfate ń fà kù nínú àwọn eku nípa ṣíṣe àtúnṣe ìfun microbiota àti mímú ìṣẹ̀dá ìfun padà sípò SCFA Derived-GLP-1
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifang,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21 Ile-ẹkọ giga Peking Shenzhen Ile-iwosan Ẹka Ile-iwosan, Shenzhen, Orilẹ-ede Eniyan ti China; 2 Ile-ẹkọ Ile-ẹkọ Imọ-jinlẹ Ilera ti Yunifasiti Shenzhen, Shenzhen, Orilẹ-ede Eniyan ti China; 3 Ile-iṣẹ Iwadi Imọ-ẹrọ Imọ-ẹrọ ti Yunifasiti Iṣoogun Guizhou Ile-iṣẹ Iwadi Imọ-ẹrọ ti Eda ati Idagbasoke ati Lilo Oogun Kannada Ibile Ile-iṣẹ Ẹkọ, Ile-iṣẹ Iwadi Key ti Guizhou Provincial ti Ile-iwosan, Guizhou Medical University, Guiyang, Orilẹ-ede Eniyan ti China; 4 Ẹka ti Gastroenterology, Ile-iwosan Peking University Shenzhen, Shenzhen, Orilẹ-ede Eniyan ti China; 5 Ile-iwe Ile-iwosan, Guizhou Medical University, Ile-ẹkọ giga Key ti Ipinle ti Iṣẹ ati Lilo Ogbin Oogun, Guiyang; 6 Ẹ̀ka Ìṣègùn Ilé Ìwòsàn, Ilé Ìwòsàn Shenzhen University, Shenzhen, China [email protected] Shen Xiangchun, Ilé Ìwòsàn Ilé Ìwòsàn, Guizhou Medical University, Guizhou, People's Republic of China, 550004, Email [email protected] Ète: Ìtọ́jú GLP-1 jẹ́ àṣàyàn ìtọ́jú tuntun fún àrùn ìfun gbígbóná. Àwọn granules Ban-Lan-Gen (BLG) jẹ́ àgbékalẹ̀ TCM antiviral tí a mọ̀ tí ó ń fi agbára ìdènà-ìwúwo hàn nínú ìtọ́jú onírúurú àrùn ìwúwo. Síbẹ̀síbẹ̀, ipa ìdènà-ìwúwo rẹ̀ lórí colitis àti ìlànà iṣẹ́ rẹ̀ kò tí ì yéni. ÀWỌN Ọ̀NÀ: Láti fi ìdí dextran sodium sulfate (DSS) tí ó ń fa ìpadàsẹ̀yìn onígbà pípẹ́ múlẹ̀ nínú àwọn eku. Àwọn àmì ìṣiṣẹ́ àrùn, àwọn àmì ìpalára histological, àti àwọn ìwọ̀n cytokine proinflammatory ni a ṣe láti ṣe àyẹ̀wò ipa ààbò ti BLG. Àwọn ipa ti BLG lórí microbiota inú ikùn àti ikùn ni a ṣe àfihàn nípasẹ̀ àwọn ìpele GLP-1 nínú ẹ̀jẹ̀ àti ìfarahàn Gcg inú ikùn, GPR41, àti GRP43, àkójọpọ̀ microbiota inú ikùn, àwọn ìpele SCFAs ìgbẹ́, àti Ìtújáde GLP-1 láti inú àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial ìṣàn eku àkọ́kọ́ SCFA tí a mú jáde láti inú GLP-1. Àwọn èsì: Ìtọ́jú BLG dín ìwúwo ara kù ní pàtàkì, DAI, ìdínkù ìṣàn eku, ìbàjẹ́ àsopọ ìṣàn eku, àti ìwọ̀n cytokine proinflammatory ti TNF-α, IL-1β, àti IL-6 nínú àsopọ ìṣàn eku. Ní àfikún, ìtọ́jú BLG le mú ìfarahàn Gcg, GPR41 àti GRP43 àti ìpele GLP-1 nínú àwọn eku colitis padà sípò ní pàtàkì, àti nípa mímú kí àwọn bakitéríà tí ń ṣe SCFA bíi Akkermansia àti Prevotellaceae_UCG-001 pọ̀ sí i, àti dín ọ̀pọ̀lọpọ̀ bakitéríà bíi Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminokoccaceae_UCG-014, Intestinimonas àti Oscillibacter dínkù. Ní àfikún, ìtọ́jú BLG le mú kí ìwọ̀n SCFA pọ̀ sí i ní ìgbẹ́ àwọn eku colitis. Ní àkókò kan náà, àwọn àyẹ̀wò in vitro tún fihàn pé ìyọkúrò ìgbẹ́ àwọn eku tí a tọ́jú BLG le mú kí àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial ìṣàn eku Murine kékeré tí ó jẹ́ àkọ́kọ́ wúlò gidigidi. Àwọn Àkótán: Àwọn àwárí wọ̀nyí fihàn pé BLG ní ipa ìdènà àrùn colitis. BLG ní agbára láti ṣe àgbékalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìtọ́jú, ó kéré tán ní apá kan nípa ṣíṣe àtúnṣe microbiota inú àti mímú ìṣẹ̀dá GLP-1 tí SCFA ti inú rẹ̀ padà. Àwọn oògùn tó ń fúnni ní ìrètí fún colitis tó ń padà bọ̀ sípò. Àwọn ọ̀rọ̀ pàtàkì: colitis, Ban-Lan-Gen granules, gut microbiota, short-chain fatty acids, GLP-1
Àrùn Ulcerative Colitis (UC) jẹ́ àrùn ìgbà pípẹ́ tí ó ń gbóná ara ní ìfun àti ìfun tí a mọ̀ sí ìgbẹ́ gbuuru, ìrora inú, pípadánù ìwọ̀n ara, àti ìgbẹ́ ẹ̀jẹ̀ mucopurulent.1 Láìpẹ́ yìí, ìbísí UC ti ń pọ̀ sí i ní àwọn orílẹ̀-èdè tí kò tíì ní àrùn náà tẹ́lẹ̀, títí kan China, pẹ̀lú bí àwọn ènìyàn ṣe ń gbé ìgbésí ayé àwọn ará ìwọ̀ oòrùn ṣe ń pọ̀ sí i.2 Ìbísí yìí ń fa àwọn ìṣòro ńlá fún ìlera gbogbogbòò, ó sì ní àwọn ipa pàtàkì lórí agbára àwọn aláìsàn láti ṣiṣẹ́ àti dídára ìgbésí ayé wọn. Lóòótọ́, àrùn UC kò tíì yé kedere, ṣùgbọ́n gbogbogbòò ni a gbà pé àwọn ìbílẹ̀, àwọn ohun tó ń fa àyíká, àwọn ohun tó ń fa àrùn inú, àti ètò ààbò ara gbogbo wọn ló ń ṣe àfikún sí ìdàgbàsókè UC.3 Kódà nísinsìnyí, kò sí ìwòsàn fún UC, ète ìtọ́jú sì ni láti ṣàkóso àwọn àmì àrùn, láti mú kí àti láti mú ìtura wá, láti mú ìwòsàn mucosal sunwọ̀n sí i, àti láti dín ìpadàbọ̀sípò padà. Àwọn ìtọ́jú ìbílẹ̀ pẹ̀lú aminosalicylates, corticosteroids, immunosuppressants, àti biologics. Síbẹ̀síbẹ̀, àwọn oògùn wọ̀nyí kò lè ṣe àṣeyọrí tí a fẹ́ nítorí onírúurú ipa ẹ̀gbẹ́ wọn.4 Láìpẹ́ yìí, ọ̀pọ̀ ìwádìí ti fihàn pé ìṣègùn ìbílẹ̀ China (TCM) ti fi agbára ńlá hàn ní ríran lọ́wọ́ láti dín UC kù pẹ̀lú ìpalára díẹ̀, èyí tí ó fihàn pé Ìdàgbàsókè àwọn ìtọ́jú TCM tuntun jẹ́ ètò ìtọ́jú tó dájú fún UC.5-7
Banlangen Granules (BLG) jẹ́ ìṣètò ìṣègùn ìbílẹ̀ ti ilẹ̀ China tí a ṣe láti inú omi tí a yọ jáde láti inú gbòǹgbò Banlangen.8 Ní àfikún sí agbára ìdènà àrùn rẹ̀, BLG ń fi agbára ìdènà àrùn hàn nínú ìtọ́jú onírúurú àrùn ìgbóná ara.9,10 Ní àfikún, a ti ya àwọn glucosinolates (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin àti glucoside sọ́tọ̀ tí a sì ti dá mọ̀ láti inú àwọn èròjà omi ti Radix isatidis) àti nucleosides (hypoxanthine, adenosine, uridine àti guanosine) àti àwọn alkaloid indigo bíi indigo àti indirubin.11,12 Àwọn ìwádìí tí ó ti kọjá ti ṣe àkọsílẹ̀ dáadáa pé àwọn èròjà adenosine, uridine àti indirubin ní ipa ìdènà àrùn ìgbóná ara nínú onírúurú àpẹẹrẹ ẹranko ti colitis.13-17 Síbẹ̀síbẹ̀, a kò tí ì ṣe àwọn ìwádìí tí ó dá lórí ẹ̀rí láti ṣe àyẹ̀wò ipa BLG nínú colitis. Nínú ìwádìí yìí, a ṣe ìwádìí nípa ipa ààbò ti BLG lórí ìpadàsẹ̀yìn àrùn ìgbóná ara onígbà pípẹ́ tí dextran sodium sulfate (DSS) fà nínú àwọn eku C57BL/6 a sì rí i pé lílo BLG ní ẹnu mú kí ìfàsẹ́yìn onígbà díẹ̀ tí DSS fà nínú àwọn eku dínkù gidigidi, ìgbóná ara, àwọn ìlànà ìṣàkóso rẹ̀ ní í ṣe pẹ̀lú ìyípadà nínú ìfun microbiota àti ìmúpadàsẹ́yìn ìṣẹ̀dá glucagon-like peptide-1 (GLP-1) tí a mú láti inú ìfun.
Àwọn granules BLG (tí kò ní suga, tí NMPA fọwọ́ sí Z11020357; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Beijing, China; nọ́mbà batch: 20110966) ni a ra láti ilé ìtajà oògùn. DSS (Ìwọ̀n Molecular: 36,000–50,000 Daltons) ni a ra láti ọ̀dọ̀ MP Biologicals (Santa Ana, USA). Sulfasalazine (SASP) (≥ 98% mímọ́), hematoxylin àti eosin ni a ra láti ọ̀dọ̀ Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Àwọn ohun èlò ìdánwò Elisa ti Mouse TNF-α, IL-1β àti IL-6 luminex ni a ra láti ọ̀dọ̀ àwọn ètò R&D (Minneapolis, MN, USA). A ra acid acetic, propionic acid, àti butyric acid láti ọ̀dọ̀ Aladdin Industries (Shanghai, China). A ra acid 2-Ethylbutyric láti ọ̀dọ̀ Merck KGaA (Darmstadt, Germany).
A ra àwọn eku C57BL/6 ọkùnrin ọ̀sẹ̀ mẹ́fà sí mẹ́jọ (ìwúwo ara 18-22 g) láti Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Beijing, China) a sì fi wọ́n sí àyíká tí ó gbóná tó 22 ± 2 °C pẹ̀lú ìmọ́lẹ̀/òkùnkùn fún wákàtí méjìlá. A fún àwọn eku ní oúnjẹ eku déédéé pẹ̀lú àǹfààní láti mu omi fún ọ̀sẹ̀ kan láti bá àyíká tuntun mu. Lẹ́yìn náà, a pín àwọn eku náà sí ẹgbẹ́ mẹ́rin láìròtẹ́lẹ̀: ẹgbẹ́ ìṣàkóso, ẹgbẹ́ àwòṣe DSS, ẹgbẹ́ tí a tọ́jú SASP (200 mg/kg, ẹnu) àti ẹgbẹ́ tí a tọ́jú BLG (1 g/kg, ẹnu). Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn nínú Àwòrán 1A, gẹ́gẹ́ bí ìwádìí wa ti tẹ́lẹ̀, a fa àrùn colitis onígbà pípẹ́ nínú àwọn eku nípa lílo ìyípo mẹ́ta ti 1.8% DSS fún ọjọ́ márùn-ún, lẹ́yìn náà a fi omi tí a ti yọ́ mọ́ fún ọjọ́ méje, gẹ́gẹ́ bí ìwádìí wa ti tẹ́lẹ̀.18 A tọ́jú àwọn eku nínú àwọn ẹgbẹ́ tí a tọ́jú SASP àti BLG pẹ̀lú SASP àti BLG, ní ọ̀kọ̀ọ̀kan, ní gbogbo ọjọ́ bẹ̀rẹ̀ láti ọjọ́ 0. Gẹ́gẹ́ bí àwọn ìwádìí àkọ́kọ́, ìwọ̀n Wọ́n ṣètò BLG sí 1 g/kg. Ní àkókò kan náà, wọ́n ṣètò ìwọ̀n SASP sí 200 mg/Kg gẹ́gẹ́ bí ìwé.4 Àwọn ẹgbẹ́ àwòṣe DSS àti àwọn ẹgbẹ́ ìṣàkóṣo náà gba ìwọ̀n omi kan náà ní gbogbo ìgbà ìdánwò náà.
Àwòrán 1 BLG ń mú kí àrùn colitis onígbà pípẹ́ tí DSS ń fà dínkù nínú àwọn eku.(A) Àwòrán àyẹ̀wò ti àrùn colitis onígbà pípẹ́ àti ìtọ́jú, (B) ìyípadà ìwọ̀n ara, (C) àmì ìṣiṣẹ́ àrùn (DAI), (D) gígùn ikùn, (E) àwòrán ìṣàpẹẹrẹ ikùn, (F) Àmì H&E Ikùn (ìbúgbà, ×100) àti (G) àmì histological. A gbé àwọn ìwádìí kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ± SEM (n = 6).##p < 0.01 tàbí ###p < 0.001 vs ẹgbẹ́ ìṣàkóso (Con); *p < 0.05 tàbí **p < 0.01 tàbí ***p < 0.001 vs ẹgbẹ́ DSS.
A máa ń kọ ìwọ̀n ara, ìdúró ìgbẹ́, àti ẹ̀jẹ̀ ìgbẹ́ ní ìdí lójoojúmọ́. A máa ń pinnu àtòjọ ìṣiṣẹ́ àrùn (DAI) nípa pípapọ̀ ìwọ̀n ìwọ̀n ara, ìdúró ìgbẹ́, àti ẹ̀jẹ̀ ìgbẹ́ ní ìdí gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé tẹ́lẹ̀.19 Ní ìparí ìdánwò náà, a pa gbogbo àwọn eku run, a sì kó ẹ̀jẹ̀, ìgbẹ́ àti ìfun jọ fún àwọn àyẹ̀wò síwájú sí i.
A fi àsopọ ìfun ṣe àtúnṣe formalin, a sì fi paraffin sí i. A ṣe àwọn apá 5-micron, a sì fi àwọ̀ hematoxylin-eosin (H&E) sí i, lẹ́yìn náà a fọ́ wọn lójú, a sì fi àmì sí i gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé rẹ̀ tẹ́lẹ̀.19
A yọ gbogbo RNA ti àsopọ inu ikun jade nipasẹ Trizol reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA), atẹle naa ni a yọ cDNA extraction pẹlu reverse transcriptase (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Japan). A ṣe PCR oniṣiro nipa lilo eto PCR gidi-akoko pẹlu SYBR Green Master (Roche, Basel, Switzerland). A ṣe awọn igbasilẹ jiini Target deede si β-actin ati pe a ṣe itupalẹ data nipa lilo ọna 2-ΔΔCT. Awọn atẹle primer jiini ni a fihan ni Tabili 1.
A ṣe ìyàsọ́tọ̀ àti ìṣẹ̀dá sẹ́ẹ̀lì epithelial colonic eku àti àṣà ìbílẹ̀ gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé tẹ́lẹ̀.20 Ní ṣókí, a kọ́kọ́ yọ àwọn eku ọ̀sẹ̀ mẹ́fà sí mẹ́jọ kúrò lẹ́yìn ìrúbọ nípa yíyọ ìfọ́ ọrùn, lẹ́yìn náà a ṣí wọn ní gígùn, a fi Hanks Balanced Salt Solution (HBSS, láìsí calcium àti magnesium) tọ́jú wọn, a sì gé wọn sí 0.5-1 mm àwọn ègé kéékèèké. Lẹ́yìn náà, a fi 0.4 mg/mL collagenase XI (Sigma, Poole, UK) jẹ àwọn àsopọ̀ ara wọn nínú DMEM medium ọ̀fẹ́, a sì fi centrifuge sí i ní 300 xg fún ìṣẹ́jú márùn-ún ní iwọ̀n otútù yàrá. A tún fi pellet náà sí àárín DMEM (tí a fi 10% serum ẹran ọmú ọmọ inú oyún kún un, 100 Units/mL penicillin, àti 100 µg/mL streptomycin) ní 37 °C kí a sì kọjá láàárín nylon mesh (iwọn ihò ~250 µm). A gbé àwọn àsopọ̀ ara ti àwọn epithelial colonic sínú àwọn àwo tí a fi gilasi ṣe, a sì fi acetic acid, propionic acid, butyric acid, àti Àwọn ìyọkúrò ìgbẹ́ eku fún wákàtí méjì ní 37°C, 5% CO2.
A fi PBS ṣe àdàpọ̀ àsopọ ìfun, a sì rí ipele cytokines IL-6, TNF-α àti IL-1β nínú àsopọ ìfun nípa lílo àwọn ohun èlò ìdánwò luminex ELISA (àwọn ètò R&D, Minneapolis, MN, USA). Bákan náà, a fi ohun èlò ELISA (Bioswamp, Wuhan, China) pinnu ipele GLP-1 nínú serum àti culture medium ti àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial murine colonic primary.
A lo ohun elo imukuro DNA (Tiangen, China). A wọn didara ati iye DNA ni awọn ipin ti 260 nm/280 nm ati 260 nm/230 nm, lẹsẹsẹ. Lẹhinna, ni lilo DNA kọọkan ti a fa jade gẹgẹbi awoṣe, a lo awọn primers kan pato 338F (ACTCCTACGGGAGGCAG) ati 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) lati mu awọn agbegbe V3-V4 ti jiini rRNA 16S pọ si ni awọn agbegbe oriṣiriṣi. A wẹ awọn ọja PCR mọ nipa lilo QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, Germany), ti a ṣe iṣiro nipasẹ PCR akoko gidi, ati ti a ṣe atẹle nipa lilo Syeed sequencing IlluminaMiseq PE300 (Illumina Inc., CA, USA). Fun itupalẹ bioinformatics, a ṣe ilana data ni atẹle awọn ilana ti a royin tẹlẹ.21,22 Ni kukuru, lo Cutadapt (V1.9.1) lati ṣe àlẹmọ awọn faili kiakia aise. A ṣe akojọpọ awọn OTUs nipa lilo UPARSE (ẹ̀yà 7.0.1001) pẹ̀lú ìgékúrú ìfarajọra ti 97%, a sì lo UCHIME láti yọ àwọn ìtẹ̀léra chimeric kúrò. A ṣe ìwádìí àti ìsọ̀rí àkójọpọ̀ àwùjọ nípa lílo ìpínsípà RDP (http://rdp.cme.msu.edu/) tí a gbé ka ibi ìpamọ́ ìjìnlẹ̀ RNA ti SILVA ribosomal.
A wọn ipele awọn fatty acids kukuru (acetic acid, propionic acid, ati butyric acid) gẹgẹ bi Tao ati awọn miiran ti ṣalaye tẹlẹ, pẹlu awọn iyipada diẹ.23 Ni ṣoki, a kọkọ da 100 miligiramu ti awọn ìgbẹ́ duro ninu 0.4 mL ti omi ti a ti yọ ion, atẹle nipa 0.1 mL ti 50% sulfuric acid ati 0.5 mL ti 2-ethylbutyric acid (boṣewa inu), lẹhinna a ṣe idapọmọra ati ki o gbona ni 4°C. Sẹ́ńtífù ní 12,000 rpm fún ìṣẹ́jú 15 ní C. A yọ 0.5 mL ti ether jáde, a sì fi sínú GC fún ìwádìí. Fún ìwádìí gaasi chromatography (GC), a ṣe àyẹ̀wò àwọn àpẹẹrẹ nípa lílo GC-2010 Plus gaasi chromatograph (Shimadzu, Inc.) tí a fi ẹ̀rọ ìwádìí iná ionization (FID) ṣe. A ṣe àyẹ̀wò ìyàsọ́tọ̀ nípa lílo ọ̀wọ̀n ZKAT-624, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., China). A gba ìwádìí nípa lílo sọ́fítíwọ́ọ̀dù omi GC (Shimadzu, Inc.). Ìpínpín pínyà náà jẹ́ 10:1, gaasi tí ń gbé e kiri ni nitrogen, àti ìwọ̀n ìṣàn náà jẹ́ 6 mL/min. Ìwọ̀n abẹ́rẹ́ náà jẹ́ 1 μL. Ìwọ̀n ìgbóná abẹ́rẹ́ àti ẹ̀rọ ìwádìí náà jẹ́ 300°C. A di ìgbóná ààrò náà mú ní 140°C fún ìṣẹ́jú 13.5, lẹ́yìn náà a pọ̀ sí 250°C ní ìwọ̀n kan ti 120°C/min; a mu iwọn otutu naa duro fun iṣẹju marun.
A gbé àwọn dátà kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí àṣìṣe ìwọ̀n ± ti àròpín (SEM). A ṣe àyẹ̀wò ìjẹ́pàtàkì dátà nípasẹ̀ ANOVA ọ̀nà kan lẹ́yìn náà, a sì tẹ̀lé ìdánwò Duncan's multiple range test. A lo sọ́fítíwètì GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) fún gbogbo ìṣirò àti pé a kà p < 0.05 sí pàtàkì nínú ìṣirò.
Ó jẹ́ mímọ̀ dáadáa pé UC jẹ́ àrùn colitis onígbà pípẹ́ tí ó ń tún ara ṣe pẹ̀lú ìrora ikùn líle, ìgbẹ́ gbuuru àti ẹ̀jẹ̀. Nítorí náà, a gbé àrùn colitis onígbà pípẹ́ tí DSS ń fà kalẹ̀ nínú àwọn eku láti ṣe àyẹ̀wò ipa BLG tí ó ń dènà colitis (Àwòrán 1A). Ní ​​ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ ìṣàkóso, àwọn eku nínú ẹgbẹ́ àpẹẹrẹ DSS ti dín ìwọ̀n ara kù gidigidi àti DAI tí ó ga jù, àwọn àyípadà wọ̀nyí sì yí padà ní pàtàkì lẹ́yìn ọjọ́ 24 ti ìtọ́jú BLG (Àwòrán 1B àti C). Kíkúrú ìfun jẹ́ àmì pàtàkì ti UC. Gẹ́gẹ́ bí a ti fihàn nínú Àwòrán 1D àti E, gígùn ìfun àwọn eku tí wọ́n gba DSS kúrú gidigidi, ṣùgbọ́n a dín wọn kù nípasẹ̀ ìtọ́jú BLG. Lẹ́yìn náà, a ṣe ìwádìí histopathological láti ṣe àyẹ̀wò ìgbóná ìfun. Àwọn àwòrán tí a ti bò àti àwọn àmì àrùn fihàn pé ìṣàkóso DSS ba ìṣètò ìfun jẹ́ gidigidi ó sì yọrí sí ìparun crypt, nígbà tí ìtọ́jú BLG dín ìparun crypt àti àwọn àmì àrùn kù ní pàtàkì (Àwòrán 1F àti G). Ní ​​pàtàkì, ipa ààbò ti BLG ní ìwọ̀n 1 g/Kg jọ ti SASP ní ìwọ̀n 200 Ní àpapọ̀, àwọn àwárí wọ̀nyí fihàn pé BLG munadoko nínú dínkù bí àrùn colitis onígbà pípẹ́ tí DSS ń fà ṣe le tó nínú àwọn eku.
TNF-α, IL-1β àti IL-6 jẹ́ àmì ìgbóná ara pàtàkì fún ìgbóná ara ìfun. Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn nínú Àwòrán 2A, DSS fa ìbísí pàtàkì nínú ìfarahàn jínì ti TNF-α, IL-1β àti IL-6 nínú ìfun ní ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ ìṣàkóso. Ìṣàkóso BLG le yí àwọn àyípadà DSS wọ̀nyí padà ní pàtàkì. Lẹ́yìn náà, a lo ELISA láti pinnu ipele ti cytokines ìgbóná ara TNF-α, IL-1β, àti IL-6 nínú àsopọ ìfun. Àwọn àbájáde náà tún fihàn pé ipele ìfun ti TNF-α, IL-1β, àti IL-6 pọ̀ sí i ní pàtàkì nínú àwọn eku tí a fi DSS tọ́jú, nígbà tí ìtọ́jú BLG dín àwọn ìbísí wọ̀nyí kù (Àwòrán 2B).
Àwòrán 2 BLG ń dí ìfarahàn àti ìṣẹ̀dá àwọn cytokines proinflammatory TNF-α, IL-1β àti IL-6 nínú ìfun àwọn eku tí DSS tọ́jú.(A) Ìfarahàn jínì ìfun ti TNF-α, IL-1β àti IL-6; (B) ìpele amuaradagba ìfun ti TNF-α, IL-1β àti IL-6. A gbé ìwífún kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ± SEM (n = 4–6).#p < 0.05 tàbí ##p < 0.01 tàbí ###p < 0.001 vs control (Con); *p < 0.05 tàbí **p < 0.01 vs DSS group.
Àìsàn ìfun jẹ́ pàtàkì nínú àrùn UC.24 Láti ṣe ìwádìí bóyá BLG ń ṣe àtúnṣe sí microbiota inú àwọn eku tí DSS tọ́jú, a ṣe ìtẹ̀léra 16S rRNA láti ṣe àyẹ̀wò àwùjọ bakitéríà ti àwọn ohun tí ó wà nínú ikùn. Àwòrán Venn fihàn pé àwọn ẹgbẹ́ mẹ́ta náà ní OTU 385. Ní àkókò kan náà, ẹgbẹ́ kọ̀ọ̀kan ní OTU àrà ọ̀tọ̀ (Àwòrán 3A). Jù bẹ́ẹ̀ lọ, àtọ́ka Chao1 àti àtọ́ka Shannon tí a fihàn ní Àwòrán 3B àti C fihàn pé onírúurú àwùjọ ti microbiota inú ikùn dínkù nínú àwọn eku tí BLG tọ́jú, nítorí pé àtọ́ka Shannon dínkù ní pàtàkì nínú ẹgbẹ́ tí BLG tọ́jú. A lo àtọ́ka ìpín pàtàkì (PCA) àti àtọ́ka ìṣàkóṣo pàtàkì (PCoA) láti pinnu àwọn ìlànà ìṣọ̀kan láàrín àwọn ẹgbẹ́ mẹ́ta náà, ó sì fihàn pé ìṣètò àwùjọ ti àwọn eku tí DSS tọ́jú ni a yà sọ́tọ̀ lẹ́yìn ìtọ́jú BLG (Àwòrán 3D àti E). Àwọn dátà wọ̀nyí fihàn pé ìtọ́jú BLG ní ipa pàtàkì lórí ìṣètò àwùjọ ti àwọn eku pẹ̀lú colitis tí DSS fà.
Àwòrán 3 BLG yí onírúurú ìfun microbiota nínú àwọn eku pẹ̀lú colitis tí DSS fà.(A) Àwòrán Venn ti OTU, (B) Àtòjọ Chao1, (C) Àtòjọ ọrọ̀ Shannon, (D) Àtòjọ àmì Ìwádìí Àpapọ̀ (PCA) ti OTU, (E) Àtòjọ àmì Ìṣàkóṣo Àpapọ̀ OTU (PCoA). Àwòrán ni a gbé kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ± SEM (n = 6).**p < 0.01 vs ẹgbẹ́ DSS.
Láti ṣe àyẹ̀wò àwọn àyípadà pàtó nínú ìgbẹ́ microbiota ìgbẹ́, a ṣe àyẹ̀wò ìṣètò ìgbẹ́ microbiota ìfun ní gbogbo ìpele taxonomic. Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn ní Àwòrán 4A, ìpìlẹ̀ pàtàkì nínú gbogbo àwọn ẹgbẹ́ ni Firmicutes àti Bacteroidetes, lẹ́yìn náà ni Verrucomirobia. Ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìpíndọ́gba Firmicutes àti Firmicutes/Bacteroides pọ̀ sí i ní àwọn agbègbè microbial ti ìgbẹ́ ti àwọn eku tí DSS ti tọ́jú ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn eku tí ó ń ṣàkóso, àwọn àyípadà wọ̀nyí sì yí padà ní pàtàkì lẹ́yìn ìtọ́jú BLG. Ní pàtàkì, ìtọ́jú BLG mú kí ìpọ̀ Verrucobacterium pọ̀ sí i ní ìgbẹ́ àwọn eku tí DSS ti fa colitis. Ní ìpele ìdílé, àwọn agbègbè microbial ti ìgbẹ́ ni Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae àti Prevotellaceae gbé (Àwòrán 4B). Ní ​​ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ DSS, ìdínkù BLG mú kí ìpọ̀lọ́pọ̀ Akkermansiaceae pọ̀ sí i, ṣùgbọ́n ó dín ìpọ̀lọ́pọ̀ Lachnospiraceae àti Ruminococcaceae kù. Ní pàtàkì, ní ìpele ìbílẹ̀, ìgbẹ́ Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia àti Prevotellaceae_UCG-001 ló gba microbiota (Àwòrán 4C). Àwárí yìí tún fi hàn pé ìtọ́jú BLG yí àìdọ́gba microbiota padà ní ìdáhùn sí ìpèníjà DSS, èyí tí a fi ìdínkù nínú Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas àti Oscillibacter hàn, àti ìbísí nínú Akkermansia àti Prevotellaceae_UCG-001 hàn.
Àwòrán 4 BLG yí ọ̀pọ̀lọpọ̀ microbiota inú ikùn padà nínú àwọn eku colitis tí DSS ń fà.(A) Ọ̀pọ̀lọpọ̀ microbiota inú ikùn ní ìpele phylum; (B) Ọ̀pọ̀lọpọ̀ microbiota inú ikùn ní ìpele ìdílé; (C) Ọ̀pọ̀lọpọ̀ microbiota inú ikùn ní ìpele ìran. A gbé àwọn ìwádìí kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ± SEM (n = 6).#p < 0.05 tàbí ###p < 0.001 vs control (Con) group; *p < 0.05 tàbí **p < 0.01 tàbí ***p < 0.001 vs DSS group.
Ní ríronú pé àwọn ọ̀rá onígun mẹ́rẹ̀ẹ̀rin (SCFAs) ni àwọn èròjà pàtàkì ti Akkermansia àti Prevotellaceae_UCG-001, nígbàtí acetate, propionate àti butyrate jẹ́ àwọn SCFA tó pọ̀ jùlọ nínú lumen ìfun, 25-27 a ṣì wà nínú ìwádìí wa. Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn ní Àwòrán 5, ìpele fecal acetate, propionate, àti butyrate dínkù gidigidi nínú ẹgbẹ́ tí DSS tọ́jú, nígbàtí ìtọ́jú BLG lè dín ìdínkù yìí kù ní pàtàkì.
Àwòrán 5. BLG mú kí ìwọ̀n SCFA pọ̀ sí i nínú ìgbẹ́ àwọn eku tí wọ́n ní àrùn colitis tí DSS fà.(A) Àkóónú ásíìdì asíìdì nínú ìgbẹ́; (B) àkóónú ásíìdì propionic nínú ìgbẹ́; (C) àkóónú ásíìdì butyric nínú ìgbẹ́. A gbé àwọn ìwádìí kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ± SEM (n = 6).#p < 0.05 tàbí ##p < 0.01 vs control (Con) group; *p < 0.05 tàbí **p < 0.01 vs DSS group.
A tún ṣírò iye Pearson correlation coefficient láàárín ìyàtọ̀ SCFA nínú ẹ̀yà àti ìgbẹ́ microbiota. Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn ní Àwòrán 6, Akkermansia ní ìbáṣepọ̀ rere pẹ̀lú ìṣẹ̀dá propionic acid (Pearson = 0.4866) àti butyric acid (Pearson = 0.6192). Ní ​​ìyàtọ̀ sí èyí, Enteromonas àti Oscillobacter ní ìbáṣepọ̀ odi pẹ̀lú ìṣẹ̀dá acetate, pẹ̀lú àwọn Pearson coefficients ti 0.4709 àti 0.5104, lẹ́sẹẹsẹ. Bákan náà, Ruminocccaceae_UCG-014 ní ìbáṣepọ̀ odi pẹ̀lú ìṣẹ̀dá propionic acid (Pearson = 0.4508) àti butyric acid (Pearson = 0.5842), lẹ́sẹẹsẹ.
Àwòrán 6 Ìṣàyẹ̀wò ìbáṣepọ̀ Pearson láàrín àwọn SCFAs tó yàtọ̀ àti àwọn kòkòrò inú.(A) Enteromonas pẹ̀lú acetic acid; (B) Concussion bacillus pẹ̀lú acetic acid; (C) Akkermansia vs propionic acid; (D) Ruminococcus_UCG-014 pẹ̀lú propionic acid; (E) Akkermansia pẹ̀lú butyric acid; (F) ) Ruminococcus _UCG-014 pẹ̀lú butyric acid.
Peptide-1 tí ó dàbí Glucagon (GLP-1) jẹ́ ọjà lẹ́yìn ìtúmọ̀-ẹ̀rọ-ara-ẹni tí ó jẹ́ irú sẹ́ẹ̀lì kan pàtó ti proglucagon (Gcg) pẹ̀lú àwọn ohun-ìní ìdènà-ìgbóná ara.28 Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn ní Àwòrán 7, DSS fa ìdínkù pàtàkì nínú ìfarahàn Gcg mRNA. Ìtọ́jú colon àti BLG le yí ìdínkù Gcg tí DSS fà padà ní pàtàkì ní ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ ìṣàkóso (Àwòrán 7A). Ní ​​àkókò kan náà, ìpele GLP-1 nínú serum dínkù gidigidi nínú ẹgbẹ́ tí DSS tọ́jú, ìtọ́jú BLG sì le dènà ìdínkù yìí gidigidi (Àwòrán 7B). Níwọ̀n ìgbà tí àwọn acids fatty chain kukuru le ru ìtújáde GLP-1 sókè nípasẹ̀ ìṣiṣẹ́ G-protein-coupled receptor 43 (GRP43) àti G-protein-coupled receptor 41 (GRP41), a tún ṣe àyẹ̀wò GPR41 àti GRP43 nínú colitis colitis a sì rí i pé ìfarahàn mRNA colonic ti GRP43 àti GPR41 dínkù gidigidi lẹ́yìn ìpèníjà DSS, ìtọ́jú BLG sì le gba àwọn ìdínkù wọ̀nyí là dáadáa (Àwòrán 7C àti D).
Àwòrán 7 BLG mú kí ìpele GLP-1 nínú ẹ̀jẹ̀ àti ìfarahàn mRNA Gcg, GPR41 àti GRP43 nínú ìfarahàn mRNA nínú àwọn eku tí DSS tọ́jú pọ̀ sí i.(A) Ìfarahàn mRNA Gcg nínú ìfarahàn mRNA inú ẹ̀jẹ̀; (B) Ìpele GLP-1 nínú ẹ̀jẹ̀; (C) Ìfarahàn mRNA GPR41 nínú ìfarahàn mRNA inú ẹ̀jẹ̀; (D) Ìfarahàn mRNA GPR43 nínú ìfarahàn mRNA inú ẹ̀jẹ̀. A gbé àwọn ìwádìí kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ± SEM (n = 5–6).#p < 0.05 tàbí ##p < 0.01 pẹ̀lú ẹgbẹ́ ìṣàkóso (Con); *p < 0.05 vs ẹgbẹ́ DSS.
Níwọ́n ìgbà tí ìtọ́jú BLG lè mú kí ipele GLP-1 nínú ẹ̀jẹ̀, ìfarahàn mRNA ti colonic Gcg, àti ipele SCFA ti ìgbẹ́ nínú àwọn eku tí DSS tọ́jú pọ̀ sí i, a tún ṣe àyẹ̀wò acetate, propionate, àti butyrate àti láti inú àwọn eku tí a ṣàkóso (F-Con), DSS colitis (F-Con) -DSS) àti colitis tí a tọ́jú BLG (F-BLG) lórí ìtújáde GLP-1 láti inú àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial murine colonic akọkọ. Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn nínú Àwòrán 8A, àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial colonic mouse primary tí a tọ́jú pẹ̀lú 2 mM acetic acid, propionic acid, àti butyric acid, lẹ́sẹẹsẹ, ru ìtújáde GLP-1 sókè gidigidi, ní ìbámu pẹ̀lú àwọn ìwádìí ìṣáájú.29,30 Bákan náà, gbogbo F-Con, F-DSS, àti F-BLG (tó dọ́gba pẹ̀lú 0.25 g ti ìgbẹ́) ru ìtújáde GLP-1 sókè gidigidi láti inú àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial murine primary. Lóòótọ́, iye GLP-1 tí àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial colonic mouse primary tí a tọ́jú F-DSS kéré púpọ̀ ju ti F-Con àti F-BLG tí a tọ́jú primary Àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial ti ìfun eku. (Àwòrán 8B). Àwọn ìwádìí wọ̀nyí fihàn pé ìtọ́jú BLG mú ìṣẹ̀dá GLP-1 tí a rí nínú ìfun SCFA padà sípò ní pàtàkì.
Àwòrán 8 SCFA tí a rí láti inú BLG mú kí ìtújáde GLP-1 jáde láti inú àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial murine àkọ́kọ́.(A) Asíìdì Asíìdì Asíìdì, propionic acid, àti butyric acid ru ìtújáde GLP-1 sókè láti inú àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial murine àkọ́kọ́; (B) àwọn ìtújáde ìgbẹ́ F-Con, F-DSS àti F-BLG ru ìfúnni ní àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial murine àkọ́kọ́. Iye GLP-1 tí a tú jáde. A gbé àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial colonic sínú àwọn àwo petri tí ó wà ní ìsàlẹ̀ gilasi, a sì fi asíìdì asíìdì asíìdì 2 mM, propionic acid, butyric acid, àti àwọn ìtújáde ìgbẹ́ F-Con, F-DSS, àti F-BLG (tó dọ́gba pẹ̀lú ìgbẹ́ 0.25 g), lẹ́sẹẹsẹ. Wákàtí méjì ní 37°C, 5% CO2, lẹ́sẹẹsẹ. ELISA ló ṣàwárí iye GLP-1 tí a tú jáde láti inú àwọn sẹ́ẹ̀lì epithelial ìṣàn ara murine. A gbé àwọn ìwádìí kalẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ± SEM (n = 3).#p < 0.05 tàbí ##p < 0.01 vs. òfo tàbí F-Con; *p < 0.05 vs. F-DSS.
Àwọn àkópọ̀: Ace, acetic acid; Pro, propionic acid; síbẹ̀síbẹ̀, butyric acid; F-Con, ìyọkúrò ìgbẹ́ láti inú àwọn eku tí a ń ṣàkóso; F-DSS, ìyọkúrò ìgbẹ́ láti inú àwọn eku colitis; F-BLG, láti inú ìfun tí a ti tọ́jú BLG. Àwọn ìyọkúrò ìgbẹ́ láti inú àwọn eku tí ń gbóná ara.
Àjọ Ìlera Àgbáyé ti kọ UC sí àrùn tí ó lè fa ìfàsẹ́yìn, ó sì ń di ewu kárí ayé; sibẹsibẹ, awọn ọna ti o munadoko fun asọtẹlẹ, idilọwọ, ati itọju arun naa tun ni opin. Nitorinaa, iwulo pajawiri wa lati ṣawari ati dagbasoke awọn ọgbọn itọju ailewu ati ti o munadoko fun UC. Awọn igbaradi oogun ibile ti China jẹ aṣayan ti o ni ileri nitori ọpọlọpọ awọn igbaradi oogun ibile ti China ti fihan pe o munadoko ninu itọju UC ni awọn olugbe China lati awọn ọrundun sẹhin, ati pe gbogbo wọn jẹ awọn ohun elo adayeba ati awọn ohun elo adayeba ti o jẹ alailewu julọ si eniyan ati ẹranko.31,32 Iwadi yii ni ero lati wa igbaradi oogun ibile ti China ti o ni aabo ati ti o munadoko fun itọju UC ati lati ṣawari ilana iṣe rẹ. BLG jẹ agbekalẹ ewebe ti China ti a mọ daradara ti a lo lati tọju ibà.8,33 Iṣẹ ninu yàrá wa ati awọn miiran ti fihan pe indigo, ọja oogun ibile ti China ti a ṣe ilana lati inu ohun elo aise kanna bi BLG, ṣafihan ipa pataki ninu itọju UC ninu eniyan ati ẹranko.4,34 Sibẹsibẹ, awọn ipa egboogi-colitis ti BLG ati awọn ipa rẹ Ilana naa ko ṣe kedere. Ninu iwadi lọwọlọwọ, awọn abajade wa fihan pe BLG n dinku igbona inu ti DSS fa ni imunadoko, eyiti o ni nkan ṣe pẹlu iyipada ti microbiota ikun ati imupadabọ ti ikun-ti a gba lati inu Iṣelọpọ GLP-1.
Ó jẹ́ mímọ̀ dáadáa pé UC ní àmì ìfàsẹ̀yìn pẹ̀lú àwọn àkókò ìfàsẹ̀yìn pẹ̀lú àwọn àmì ìṣègùn tó wọ́pọ̀, bíi pípadánù ìwọ̀n ara, ìgbẹ́ gbuuru, ẹ̀jẹ̀ inú, àti ìbàjẹ́ tó pọ̀ nínú awọ ara.35 Nítorí náà, a fún ni ní àrùn colitis onígbà pípẹ́ nípa lílo àwọn ìpele mẹ́ta ti 1.8% DSS fún ọjọ́ márùn-ún, lẹ́yìn náà ni a fi omi mímu ọjọ́ méje. Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn nínú Àwòrán 1B, pípadánù ìwọ̀n ara tó ń yí padà àti àwọn àmì DAI fihàn pé àrùn colitis onígbà pípẹ́ ń fa àṣeyọrí. Àwọn eku nínú ẹgbẹ́ tí a tọ́jú pẹ̀lú BLG fi ìpadàbọ̀sípò tó ga sí i láti ọjọ́ kẹjọ, èyí tó yàtọ̀ sí ọjọ́ kẹrìnlélógún. Àwọn àyípadà kan náà ni a tún rí nínú àmì DAI, èyí tó fihàn pé ìdàgbàsókè ti àrùn colitis ń bá a lọ. Ní ti ìpalára àrùn colitis àti ipò ìgbóná ara, gígùn àrùn colon, ìbàjẹ́ àsopọ inú, àti ìfarahàn jínì àti ìṣẹ̀dá àwọn cytokines proinflammatory TNF-α, IL-1β, àti IL-6 nínú àsopọ inú tún dara síi lẹ́yìn ìtọ́jú BLG. Ní àpapọ̀, àwọn àbájáde wọ̀nyí fihàn gbangba pé BLG munadoko nínú ìtọ́jú àrùn colitis onígbà pípẹ́ nínú àwọn eku.
Báwo ni BLG ṣe ń lo àwọn ipa oògùn rẹ̀? Ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìwádìí ìṣáájú ti fihàn pé microbiota inú ikùn ń kó ipa pàtàkì nínú ìṣẹ̀dá UC, àti àwọn ìtọ́jú tí a fi microbiome ṣe àti microbiome tí a fojú sí ti yọrí sí ọ̀nà tí ó fani mọ́ra gidigidi fún ìtọ́jú UC. Nínú ìwádìí yìí, a fihàn pé ìtọ́jú BLG yọrí sí àwọn àyípadà pàtàkì nínú àkójọpọ̀ microbiota inú ikùn, tí ó fihàn pé ipa ààbò ti BLG lòdì sí colitis tí DSS fà ní í ṣe pẹ̀lú ìyípadà ti microbiota inú ikùn. Àkíyèsí yìí bá èrò náà mu pé ṣíṣe àtúntò homeostasis ti microbiota inú ikùn jẹ́ ọ̀nà pàtàkì láti lóye ipa àwọn ìpèsè TCM.36,37 Pàtàkì, Akkermansia jẹ́ bakitéríà Gram-negative àti anaerobic tí ó ń gbé nínú ìpele mucus ti inú ikùn, èyí tí ó ń ba mucins jẹ́, tí ó ń mú propionic acid jáde, tí ó ń ru ìyàtọ̀ sẹ́ẹ̀lì goblet sókè, tí ó sì ń ṣe ìtọ́jú mucosa. iṣẹ́ ìdènà ìdúróṣinṣin.26 Ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìwádìí ìṣègùn àti ẹranko fihàn pé Akkermansia ní ìbáṣepọ̀ pẹ̀lú mucosa tí ó ní ìlera,38 àti ìtọ́jú ẹnu ti Akkermansia spp. le mu igbona inu mucosal dara si ni pataki.39 Awọn data lọwọlọwọ wa daba pe opo ibatan ti Akkermansia pọ si ni pataki lẹhin itọju BLG. Ni afikun, Prevotellaceae_UCG-001 jẹ kokoro arun ti o n ṣe agbejade SCFA.27 Ọpọlọpọ awọn iwadii fihan pe a rii Prevotellaceae_UCG-001 ni opo kekere ninu igbẹ́ awọn ẹranko ti o ni colitis.40,41 Awọn data lọwọlọwọ wa tun fihan pe itọju BLG le mu opo ibatan ti Prevotellaceae_UCG-001 pọ si ni pataki ni ifun awọn eku ti a tọju DSS. Ni idakeji, Oscillibacter jẹ kokoro arun mesophilic, ti o muna anaerobic.42 royin pe opo ibatan ti Oscillibacter pọ si ni pataki ni awọn eku UC ati pe o ni ibatan rere pẹlu awọn ipele IL-6 ati IL-1β ati awọn ikun aisan.43,44 Ni pataki, itọju BLG dinku opo ibatan ti Oscillibacter ninu igbẹ́ awọn eku ti a tọju DSS. Ni pataki, awọn kokoro arun ti a yipada ti BLG wọnyi ni awọn kokoro arun ti o n ṣe agbejade SCFA julọ. Ọpọlọpọ awọn iwadi iṣaaju ti ṣafihan awọn ipa anfani ti o ṣeeṣe ti SCFAs lórí ìgbóná inú ìfun àti ààbò ìdúróṣinṣin epithelial ìfun.45,46 Àwọn ìwádìí wa lọ́wọ́lọ́wọ́ tún ṣàkíyèsí pé ìwọ́n SCFA acetate, propionate, àti butyrate nínú ìgbẹ́ tí DSS tọ́jú pọ̀ sí i nínú àwọn eku tí BLG tọ́jú. Ní ìbámu pẹ̀lú wọn, àwọn àwárí wọ̀nyí fihàn gbangba pé ìtọ́jú BLG lè mú kí àwọn bakitéríà tí DSS ń ṣe SCFA pọ̀ sí i nínú àwọn eku tí wọ́n ní colitis tí ń padà bọ̀ sípò.
GLP-1 jẹ́ incretin tí a sábà máa ń ṣe ní ileum àti colon, ó sì ń kó ipa pàtàkì nínú dídádúró ìtújáde ikùn àti dín glucose ẹ̀jẹ̀ lẹ́yìn ìtọ́jú.47 Ẹ̀rí fihàn pé dipeptidyl peptidase (DPP)-4, agonist olugba GLP-1, àti nanomedicine GLP-1 lè dín ìgbóná inú ìfun kù nínú àwọn eku lọ́nà tí ó dára.48-51 Gẹ́gẹ́ bí a ti ròyìn rẹ̀ nínú àwọn ìwádìí tí ó ti kọjá, àwọn ìpele SCFA gíga ní ìbáṣepọ̀ pẹ̀lú ipele GLP-1 plasma nínú ènìyàn àti eku. 52 Àwọn ìwádìí wa lọ́wọ́lọ́wọ́ fihàn pé lẹ́yìn ìtọ́jú BLG, ipele GLP-1 nínú ẹ̀jẹ̀ àti ìfarahàn Gcg mRNA pọ̀ sí i ní pàtàkì. Bákan náà, ìtújáde GLP-1 pọ̀ sí i ní pàtàkì nínú àwọn àṣà ìfun lẹ́yìn ìfúnni pẹ̀lú àwọn ìtújáde ìgbẹ́ láti inú àwọn eku colitis tí a tọ́jú BLG ní ìfiwéra pẹ̀lú ìfúnni pẹ̀lú àwọn ìtújáde ìgbẹ́ láti inú àwọn eku colitis tí a tọ́jú DSS. Báwo ni SCFA ṣe ní ipa lórí ìtújáde GLP-1?Gwen Tolhurst àti àwọn ẹlẹgbẹ́ rẹ̀. ròyìn pé SCFA le ru ìtújáde GLP-1 sókè nípasẹ̀ GRP43 àti GPR41.29 Àwọn ìwádìí wa lọ́wọ́lọ́wọ́ tún fihàn pé ìtọ́jú BLG mú kí ìfarahàn mRNA ti GRP43 àti GPR41 pọ̀ sí i ní ìfun àwọn eku tí DSS ti tọ́jú. Àwọn ìwádìí wọ̀nyí fihàn pé ìtọ́jú BLG le mú ìṣẹ̀dá GLP-1 tí SCFA gbéga padà nípa ṣíṣiṣẹ́ GRP43 àti GPR41.
BLG jẹ́ oògùn tí a ń lò lórí ìwé àyẹ̀wò fún ìgbà pípẹ́ (OTC) ní orílẹ̀-èdè China. Ìwọ̀n BLG tí a lè lò fún àwọn eku Kunming tó pọ̀ jùlọ jẹ́ 80g/Kg, a kò sì rí ìpalára tó le koko.53 Lọ́wọ́lọ́wọ́, ìwọ̀n BLG tí a dámọ̀ràn (láìsí sùgà) nínú ènìyàn jẹ́ 9-15 g/ọjọ́ (ní ìgbà mẹ́ta lọ́sàn-án). Ìwádìí wa fihàn pé BLG ní 1g/Kg tí ó ń mú kí àrùn colitis onígbà pípẹ́ tí DSS fà dẹ́kun nínú àwọn eku. Ìwọ̀n yìí sún mọ́ ìwọ̀n BLG tí a lò nílé ìwòsàn. Ìwádìí wa tún rí i pé ọ̀nà ìṣe rẹ̀ jẹ́ ti, ó kéré tán ní apá kan, nípasẹ̀ àwọn àyípadà nínú microbiota inú, pàápàá jùlọ àwọn bakitéríà tí ń ṣe SCFA, bíi Akkermansia àti Prevotellaceae_UCG-001, láti mú ìṣẹ̀dá GLP-1 tí a ti inú ikùn padà bọ̀ sípò. Àwọn àwárí wọ̀nyí fihàn pé BLG yẹ fún àgbéyẹ̀wò síwájú sí i gẹ́gẹ́ bí olùtọ́jú ìtọ́jú fún ìtọ́jú colitis. Síbẹ̀síbẹ̀, ìlànà pàtó tí ó fi ń ṣe àtúnṣe microbiota inú ikùn ṣì wà láti jẹ́rìí sí i nípasẹ̀ àwọn eku tí kò ní microbiota àti ìṣàtúnṣe bacteria nínú ìgbẹ́.
Ace, acetic acid; but, butyric acid; BLG, pandan; DSS, dextran sodium sulfate; DAI, atọka iṣẹ-ṣiṣe arun; DPP, dipeptidyl peptidase; FID, ẹrọ wiwa ionization ina; F-Con, iṣakoso awọn iyọkuro ti awọn eku; F-DSS, awọn iyọkuro ti awọn eku DSS colitis; F-BLG, awọn iyọkuro ti awọn eku colitis ti a tọju BLG; GLP-1, glucagon-like peptide-1; Gcg, glucagon; gaasi chromatography, gaasi chromatography; GRP43, G protein-coupled receptor 43; GRP41, G protein-coupled receptor 41; H&E, hematoxylin-eosin; HBSS, Hanks' Balanced Iyọ̀ Solution; OTC, OTC; PCA, itupalẹ awọn paati akọkọ; PCoA, itupalẹ iṣakoso akọkọ; Pro, propionic acid; SASP, sulfasalazine; SCFA, awọn acids ọra kukuru; oogun China, oogun ibile China; UC, ulcerative colitis.
Gbogbo awọn ilana idanwo ni Igbimọ Ẹtọ Eranko ti Ile-ẹkọ giga Peking Shenzhen-Hong Kong Ile-ẹkọ giga ti Imọ-jinlẹ ati Imọ-ẹrọ (Shenzhen, China) fọwọsi gẹgẹbi Awọn Itọsọna Ile-iṣẹ ati Awọn Ilana Ẹranko (nọmba iwa-rere A2020157).
Gbogbo àwọn òǹkọ̀wé ló ṣe àfikún pàtàkì sí ìmòye àti ìṣètò, gbígbà dátà, tàbí ìṣàyẹ̀wò dátà àti ìtumọ̀; wọ́n kópa nínú kíkọ àpilẹ̀kọ náà tàbí ṣíṣe àtúnṣe àkóónú ìmọ̀ pàtàkì; wọ́n gbà láti fi ìwé àfọwọ́kọ náà sílẹ̀ fún ìwé àkọọ́lẹ̀ ìsinsìnyí; wọ́n sì fọwọ́ sí àtúnṣe náà nígbẹ̀yìn gbẹ́yín; wọ́n sì ṣe gbogbo iṣẹ́ náà.
Iṣẹ́ yìí ni National Natural Science Foundation of China (81560676 àti 81660479) ṣe àtìlẹ́yìn fún, iṣẹ́ àkànṣe ti ilé-ẹ̀kọ́ gíga ti Shenzhen University (86000000210), Shenzhen Science and Technology Innovation Committee Fund (JCYJ20210324093810026), àti Guangdong Provincial Medical Science and Technology Research Fund (A2020157 àti A2020272), Guizhou Medical University Pharmacy Guizhou Province tí Key Laboratory (YWZJ2020-01) àti Peking University Shenzhen Hospital (JCYJ2018009) ṣe ìrànlọ́wọ́ fún.
1. Tang B, Zhu J, Zhang B, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ. Àǹfààní ìtọ́jú ti triptolide gẹ́gẹ́ bí ohun tí ó ń dènà ìgbóná ara nínú àyẹ̀wò colitis tí dextran sodium sulfate fà nínú àwọn eku.pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. Ẹrù gbogbo àgbáyé ti IBD: láti ọdún 2015 sí 2025.Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2015;12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ. Àwọn alkaloid tí a mú jáde láti inú ewéko: àwọn àtúnṣe àrùn tí ó dájú nínú àrùn ìgbóná inú ìfun.Prepharmacology.2019;10:351.doi:10.3389/ffhar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ. Indigo Naturalis ń dènà wahala oxidative ti inu ati awọn idahun Th1/Th17 ninu colitis ti DSS fa ninu awọn eku. Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Lilo ati aabo Sophora flavescens (Sophora flavescens) Oògùn ewéko ti ilẹ̀ China ninu itọju ulcerative colitis: ẹri ile-iwosan ati awọn ilana ti o ṣeeṣe.Prepharmacology.2020;11:603476.doi:10.3389/ffhar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Àwọn ọjà àdánidá: àwọn oògùn tó gbéṣẹ́ fún ìtọ́jú àrùn ìfun tó ń gbóná. Curr Pharmaceuticals.2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Àwọn àtúnyẹ̀wò lórí ìtọ́jú adjuvant ti ulcerative colitis pẹ̀lú ìṣègùn ìbílẹ̀ ti China. Ìṣègùn Ìṣègùn Ìpara Àrùn Allergy.2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ. Ìmúnádóko àti ààbò àwọn granules Banlangen nínú ìtọ́jú influenza àsìkò: ìlànà ìwádìí fún ìwádìí tí a ṣàkóso láìsí ìyípadà.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x